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八棱海棠树苗病毒检测方法

时间:2021-01-10 11:53 作者:王经理
经脱毒处理的脱毒八棱海棠种苗,应该用指示植物、电镜或酶联免疫吸附等方法进行脱毒鉴定,由于再培养的植株许多病毒具有逐级恢复的特点,所以在茎尖植株和再生植株生长的最初10个月中,每隔一定时期必须重复进行脱毒苗的鉴定,只有那些持续呈阴性反应的才是真正的无病毒植株,可作为种源进行快速繁殖。
1、指示植物法 是利用病毒在其他植物上产生特定症状作为鉴别病毒存在与否及种类的方法。此种方法具有灵敏、准确、可靠、操作简便的优点。常用指示植物分为木本指示植物和草本指示植物两种。在选择指示植物时应满足以下要求:应根据不同病毒,选择合适的指示植物;指示植物要容易栽培;同时它对要鉴别的病毒敏感,易接种,易感染,症状显著。指示植物鉴定法对依靠汁液传播的病毒,可采用汁液涂抹鉴定法,对不能依靠汁液传播的病毒,则采用指示楂物嫁接法。
八棱海棠树苗病毒检测方法
2、抗血清鉴定法 凡能刺激动物机体产生免疫反应的物质,称为抗原。抗体则是由抗原刺激动物机体的免疫活性细胞而生成的一种具有免疫特性的球蛋白能与该抗原发生专化性免疫反应,它存在于血清中,故称抗血清,由于植物病毒为一种核蛋白复合体,因此它也具有抗原的作用,能刺激动物机体的免疫活性细胞产生抗体。同时由于植物病毒抗血清具有高度的专化性,感病植株无论是显性还是隐性,都可以通过血清学的方法准确地判断植物病毒的存在与否、存在的部位和数量。由于其特异性高,测定速度快,所以抗血清也成为植物病毒检测最常用的方法之一。
3、电镜检查法 利用电镜可直接观察、检查出有无病毒存在,并可得知有关病毒颗粒的大小、形状和结构,由于这些特征是相当稳定的,故对病毒鉴定及研究一种未知的病原物是很重要的,但鉴定方法要求的技术条件较高,电镜设备也很昂贵,所以此方法目前尚不能普遍应用.
4、酶联免疫吸附法 此法能快速地进行病毒鉴定,因此,特别适用于木本植物上的病毒鉴定,它的优点是:专一性高,结果准确,快速简便,一般几小时甚至几分钟就可完成,此法是把抗原和抗体的免疫反应和酶的高效催化作用结合起来.形成一种酶标记的免疫复合物,结合在该复合物上的酶,遇到相应的底物时,催化无色的底物产生水解反应,形成有色的产物,从而可以用肉眼观察或用比色法定性定量地判断结果。
 

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